La penicilline du rocquefort semble être inhibitrice sur le chlamydia pneumoniae

 

 

roquefortUn peu de rocquefort de bonne qualité et un vin rouge naturel pourrait jouer un rôle dans l’inhibition du chlamydia pneumoniae…Bonne nouvelle ça change du protocole chimique classique ! Ce n’est pas une blague c’est la traduction d’un journal scientifique qui se base sur des études sérieuses !

Dans le protocole du docteur Rau le roquefort semble faire parti du traitement.

Un lien épidémiologique entre la réduction de la mortalité cardio-vasculaire et de la consommation modérée de vin chez les adultes français et méditerranéens, connu comme le «paradoxe français» , a suscité l’intérêt constant de chercheurs medicobiologiste au cours des deux dernières décennies. Il a été prouvé dans de nombreuses études cliniques et expérimentales que les constituants communs de vin rouge resvératrol et d’autres polyphénols-ont des avantages de santé multiples résultant de leur anti-inflammatoire, anticarcinogenic, et antiathérogènes, propriétés et contribuer ainsi à l’apparition du «paradoxe français». le mécanisme moléculaire derrière l’activité biologique des polyphénols alimentaires a été largement revu.
Les recherches en cours approfondi sur la question a conduit à la réalisation progressive qu’il existe d’autres déterminants alimentaires et non-alimentaires qui contribuent à la mortalité cardiovasculaire réduite dans les populations françaises et méditerranéennes. En particulier, la consommation élevée d’acides gras oméga-3 acides gras, les flavonoïdes, et de fibres alimentaires peuvent également contribuer aux mécanismes du «paradoxe français».

Fromages et produits contenant de fromage sont des ingrédients importants de la diète méditerranéenne. On a supposé que la consommation élevée de fromage peut en quelque sorte contribuer à des changements favorables dans le profil lipidique et réduction du risque de maladie cardiovasculaire. En effet, les variétés de fromages fermentés fongiques bleu et d’autres, qui sont une marque de commerce de la culture culinaire française, peuvent posséder des avantages mesurables sur la santé en raison de la présence de nombreuses substances fonctionnelles dans leur noyau. Les  fromages bleus ont été montré pour contenir des acides gras à chaîne courte, les cétones de méthyle, et les alcools secondaires. Évaluation de la population microbienne dans le fromage bleu révèle que Penicillium roqueforti, Penicillium glaucum et Geotrichum candidum sont trois grands champignons distinguables, tandis que Lactocococcus lactis, Lactococcus garvieae et Lactococcus raffinolactis peuvent être identifiés dans des échantillons de fromage bleu au cours des différentes étapes de la maturation. P. roqueforti métabolites montrent en particulier une large gamme d’activité pharmacologique. Andrastins A, B, C, et D sont toujours produites dans le fromage bleu et sont de puissants inhibiteurs de la farnésyl, une enzyme importante de la biosynthèse du cholestérol. Andrastin A est également connu pour afficher les propriétés antitumorales fortes . D’autres substances, y compris roquefortine, un composé avec des propriétés neurotoxiques, limitent la croissance des bactéries à Gram positif en inhibant le cytochrome P-450 . L’activité biologique des métabolites produits par d’autres champignons n’a pas encore été étudié.

Dans le présent document, nous déclarons que Roquefort extrait de fromage inhibe la propagation de C. pneumoniae dans la lignée cellulaire cultivée, tandis que l’alimentation Roquefort atténue la réponse migratoire induite par le LPS des leucocytes péritonéale et provoque des changements importants dans les sous-populations de cellules immunitaires.
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2. Matériels et méthodes
2.1. Réactifs et organismes

Tous les réactifs proviennent de chez Sigma-Aldrich, sauf indication contraire. cellules HL (Fondation Washington Research, Seattle, États-Unis) ainsi que C. pneumoniae (souche Kajaani6, K6) ont été aimablement fournies par le Dr P. Saikku (Université d’Oulu, Finlande). Roquefort Société (Société) a été acheté auprès d’un fournisseur d’épicerie générale à Cambridge, Royaume-Uni. échantillons de fromage ont été homogénéisés et traités pour l’extraction de protéines avant les dates d’expiration. A / JSnYCit (A / Sn) / souris c, les hommes âgés de 2 à 4 mois, ont été élevés et maintenus dans des conditions classiques aux installations vétérinaires de l’Institut d’épidémiologie et de microbiologie (Moscou, Russie), conformément aux directives de la Russie Ministère de la Santé (numéro 755). Nourriture et l’eau ont été fournis ad libitum. Toutes les procédures expérimentales ont été effectuées en vertu d’un protocole approuvé par le Comité de protection des animaux dans les institutions.
2.2. Roquefort Fractionnement

Pour obtenir une protéine extrait 10-15 g échantillon de fromage Roquefort a été placé dans 10-15 ml de PBS et les échantillons ont été homogénéisés en utilisant un Omni TH-115. Les suspensions résultantes ont été maintenus pendant 1 heure à 4 ° C et centrifugés pendant 15 min à 10 000 g en utilisant une centrifugeuse Eppendorf 5810R. Le surnageant obtenu est à nouveau centrifugé pendant 15 min à 10 000 g dans une centrifugeuse Eppendorf 5115D. Le surnageant résultant a été utilisé pour le fractionnement ultérieur.

L’extrait de protéines a été fractionné par filtration sur gel sur une colonne de 1,5 x 9,0 cm de Sephadex G-25 équilibrée avec du PBS moyenne. La colonne a été précalibré pour déterminer le volume libre et total à l’aide de dextran bleu et DNP-L-Ala. Pour chaque expérience, 3 mL de l’extrait de fromage a été introduit dans la colonne et les fractions d’élution ont été recueillies comme les volumes suivants: numéro de la fraction « 1 » à 6 ml, fraction intermédiaire « 2 » 4 ml, et la dernière fraction « 3 » jusqu’à 10 ml. Les concentrations en protéines ont été déterminées par absorption à 280 nm sur un Shimadzu UV 1,800 spectrophotomètre. Les trois fractions protéiques ont été rassemblées, dialysées, lyophilisées et conservées à -80 ° C pour des études ultérieures.
2.3. Études in vitro

C. pneumoniae a d’abord été propagé dans des cellules HL et de corps élémentaires (EB) ont été purifiés par centrifugation sur gradient de Renografin [15]. Les titres Chlamydia ont été déterminées en infectant des cellules HL avec des dilutions de 10 fois de décongelé suspension stock. corps élémentaires purifiées (EB) de titre connu ont été suspendues dans un tampon d’acide saccharose-phosphate-glutamique et utilisés comme inoculum pour les cellules HL. Les cellules ont été cultivées dans des plaques 24 puits jusqu’à un taux de 80% de confluence a été atteinte. des plaques de HL ont été infectées par C. pneumoniae à des multiplicités d’infection (MOI) de 1 dans du DMEM avec du FBS sans cycloheximide et on centrifuge pendant 1 heure à 1500 g. Addition de la protéine du fromage Exract dissous dans du PBS à des concentrations de 0,12, 0,25 et 0,5 mg / ml a été effectuée simultanément avec l’inoculation de C. pneumoniae.

2.3.1. immunofluorescence

Les monocouches infectées HL cultivées sur des lamelles couvre-objet dans des plaques à 24 puits pendant 72 heures ont été fixées avec du methanol. Les cellules perméabilisées ont été colorées par immunofluorescence directe (IF) en utilisant un anticorps monoclonal FITC conjugué contre le lipopolysaccharide chlamydia (Nearmedic Plus, RF). les cellules contenant l’inclusion-ont été visualisées en utilisant un Nikon Eclipse fluorescence 50i microscope × 1350 grossissement.

2.3.2. Évaluation des Infective Progeny

Afin d’évaluer l’accumulation de descendance infectieux dans les cellules HL après une période de culture de 72 heures, les cellules HL ont été récoltées, congelées et décongelées, comme décrit ailleurs. Des dilutions en série des lysats ont été inoculées sur des cellules HL et on centrifuge pendant 1 heure à 1500 g. Les cellules infectées ont été visualisées avec un anticorps monoclonal spécifique du LPS chlamydia après 72 heures de la période de post-infection.

 

Source : http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3655667/


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